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活體成像慢病毒
背景介紹

        

可見光活體成像技術,主要采用生物發光(Bioluminescence)和熒光(Fluorescence)這兩種技術,廣泛地應用于醫學及生物學研究領域。
       

 使用生物發光技術進行活體成像研究,如用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或者DNA,是一種活體生物的光生化反應,特異性強,無自發熒光,靈敏度高,在體內可以檢測到幾百個細胞,檢測深度在3-4cm,可以精確定量。然后通過高度靈敏的CCD設備形成圖像,直接監控活體生物體內的細胞活動和基因行為,研究人員借此可以觀測腫瘤的生長及轉移、感染性疾病發展過程、特定基因的表達等生物學過程。
        

使用熒光技術進行活體成像研究,如用熒光蛋白(如GFP,RFP等)對細胞或者DNA進行標記,只需用相當簡單的設備進行觀察及捕獲成像照片,并且不需要完全黑暗的環境。GFP熒光相對不受外部環境的影響,因為發色團受蛋白質的三維結構保護。標記有GFP綠色熒光蛋白的細胞已用于追蹤活嚙齒動物的轉移和血管生成,GFP綠色熒光蛋白表達細菌已用于研究小鼠中空間遷移和感染過程的行為。

基本原理與應用


基本原理


生物發光是將Fluc基因整合到細胞染色體DNA上以表達熒光素酶,當外源(腹腔或靜脈注射)給予其底物熒光素(luciferin),即可在幾分鐘內產生發光現象。這種酶在ATP及氧氣的存在條件下,催化熒光素的氧化反應才可以發光,因此只有在活細胞內才會產生發光現象,并且光的強度與標記細胞的數目線性相關。然后在體外利用敏感的CCD設備形成圖像。此外,熒光素酶基因可以被插入多種基因的啟動子,成為某種基因的報告基因,通過監測報告基因從而實現對目標基因的監測。


生物發光本質為化學熒光,熒光素被熒光素酶氧化的過程中可以釋放波長廣泛的可見光子,其波長范圍為460-630nm(平均波長560nm)。在哺乳動物體內,血紅蛋白是吸收可見光的主要成分,能吸收藍綠光波段中的大部分可見光;水和脂質主要吸收紅外線,但其均對波長為590-800nm的紅光近紅外線吸收能力較差,因此波長超過600nm的紅光雖然有部分散射消耗但大部分可以穿透哺乳動物組織而被高靈敏CCD 檢測到。



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  熒光素發光反應原理



熒光發光是通過激發光激發熒光基團到達高能量狀態,而后產生發射光??紤]到不同熒光物質的發射光譜EX(excitation spectrum)和激發光譜 EM(emission 8pectrum)的不同, 要選擇對應的激發和發射濾片。



比較區別



優點缺點
生物發光

特異性強,靈敏度高,且無自發熒光; 

能夠進行精確定量;

信號較弱,檢測時間較長; 

需要高度靈敏的儀器設備; 

需要底物;

熒光成像

信號強度大,可直接觀察成像; 

有多種蛋白和染料可用;

存在非特異性熒光; 檢測深度受到局限; 需要不同波長激發光,難精確體內定量;




應用如下


1.標記細胞,如疾病及藥物研究、干細胞研究、細胞凋亡研究; 

2.標記基因,如轉基因動物模型研究,基因表達和藥物代謝研究;

3.標記DNA及RNA,特別是基因治療方面的應用; 

4.標記細菌,如研究蛋白質相互作用、代謝等。利用活體生物熒光成像技術可以檢測到,并能連續觀察其對機體的侵染過程以及抗病毒藥物和抗生素對其病理過程的影響。


將攜帶熒光素酶編碼基因(Luciferase)的質?;虿《巨D染入細胞,再導入研究動物如大、小鼠體內,之后注入底物熒光素(通常以熒光素鉀鹽或鈉鹽的形式),通過生物發光成像技術(BLI)來檢測光強度變化,從而實時監測疾病發展狀態或藥物的治療功效等。


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產品清單
產品貨號 產品名稱 產品規格
GM-0220IV101
CMV-GFP-Luc Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV102
CMV-GFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV201
CMV-GFP-Luc-Puro Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV202
CMV-mCherry-Luc-Puro Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV203
EF1a-GFP-Luc-Puro Lentivirus
100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV205
CMV-YFP-Luc Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV207
CMV-CFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV208
EF1a-Mcherry-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV209
CMV-luc-Neo Lentivirus
50μl*2管 (1E9TU/mL)
GM-0220IV210
CMV-Luc-Puro Lentivirus
50μl*2管 (1E9TU/mL)
GM-0220IV211
CMV-Luc-Puro Lentivirus
100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV212
CMV-Luc-Blasticidin Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV213
CMV-mCherry-Luc-Blasticidin Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV214
CMV-RFP-Luc Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV216
CMV-RFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV217
CMV-Luc-Blasticidin Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV218
CMV-luc-Neo Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV219
EF1a-YFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV220
EF1a-CFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV221
CMV-YFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV223
CMV-CFP-Luc Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV224
CMV-GFP-Luc-Neo Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV225
CMV-GFP-Luc-Neo Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
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CMV-GFP-Luc Lentivirus
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GM-0220IV102
CMV-GFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV201
CMV-GFP-Luc-Puro Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV202
CMV-mCherry-Luc-Puro Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
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50μl*2管 (1E9 TU/mL)
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100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV208
EF1a-Mcherry-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV209
CMV-luc-Neo Lentivirus
50μl*2管 (1E9TU/mL)
GM-0220IV210
CMV-Luc-Puro Lentivirus
50μl*2管 (1E9TU/mL)
GM-0220IV211
CMV-Luc-Puro Lentivirus
100μl*10管 (1E8TU/mL)
GM-0220IV212
CMV-Luc-Blasticidin Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
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100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV214
CMV-RFP-Luc Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV216
CMV-RFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV217
CMV-Luc-Blasticidin Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV218
CMV-luc-Neo Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV219
EF1a-YFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV220
EF1a-CFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV221
CMV-YFP-Luc Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV223
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50μl*2管 (1E9 TU/mL)
GM-0220IV224
CMV-GFP-Luc-Neo Lentivirus
100μl*10管 (1E8 TU/mL)
GM-0220IV225
CMV-GFP-Luc-Neo Lentivirus
50μl*2管 (1E9 TU/mL)
背景介紹

        

可見光活體成像技術,主要采用生物發光(Bioluminescence)和熒光(Fluorescence)這兩種技術,廣泛地應用于醫學及生物學研究領域。
       

 使用生物發光技術進行活體成像研究,如用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或者DNA,是一種活體生物的光生化反應,特異性強,無自發熒光,靈敏度高,在體內可以檢測到幾百個細胞,檢測深度在3-4cm,可以精確定量。然后通過高度靈敏的CCD設備形成圖像,直接監控活體生物體內的細胞活動和基因行為,研究人員借此可以觀測腫瘤的生長及轉移、感染性疾病發展過程、特定基因的表達等生物學過程。
        

使用熒光技術進行活體成像研究,如用熒光蛋白(如GFP,RFP等)對細胞或者DNA進行標記,只需用相當簡單的設備進行觀察及捕獲成像照片,并且不需要完全黑暗的環境。GFP熒光相對不受外部環境的影響,因為發色團受蛋白質的三維結構保護。標記有GFP綠色熒光蛋白的細胞已用于追蹤活嚙齒動物的轉移和血管生成,GFP綠色熒光蛋白表達細菌已用于研究小鼠中空間遷移和感染過程的行為。

基本原理與應用


基本原理


生物發光是將Fluc基因整合到細胞染色體DNA上以表達熒光素酶,當外源(腹腔或靜脈注射)給予其底物熒光素(luciferin),即可在幾分鐘內產生發光現象。這種酶在ATP及氧氣的存在條件下,催化熒光素的氧化反應才可以發光,因此只有在活細胞內才會產生發光現象,并且光的強度與標記細胞的數目線性相關。然后在體外利用敏感的CCD設備形成圖像。此外,熒光素酶基因可以被插入多種基因的啟動子,成為某種基因的報告基因,通過監測報告基因從而實現對目標基因的監測。


生物發光本質為化學熒光,熒光素被熒光素酶氧化的過程中可以釋放波長廣泛的可見光子,其波長范圍為460-630nm(平均波長560nm)。在哺乳動物體內,血紅蛋白是吸收可見光的主要成分,能吸收藍綠光波段中的大部分可見光;水和脂質主要吸收紅外線,但其均對波長為590-800nm的紅光近紅外線吸收能力較差,因此波長超過600nm的紅光雖然有部分散射消耗但大部分可以穿透哺乳動物組織而被高靈敏CCD 檢測到。



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  熒光素發光反應原理



熒光發光是通過激發光激發熒光基團到達高能量狀態,而后產生發射光??紤]到不同熒光物質的發射光譜EX(excitation spectrum)和激發光譜 EM(emission 8pectrum)的不同, 要選擇對應的激發和發射濾片。



比較區別



優點缺點
生物發光

特異性強,靈敏度高,且無自發熒光; 

能夠進行精確定量;

信號較弱,檢測時間較長; 

需要高度靈敏的儀器設備; 

需要底物;

熒光成像

信號強度大,可直接觀察成像; 

有多種蛋白和染料可用;

存在非特異性熒光; 檢測深度受到局限; 需要不同波長激發光,難精確體內定量;




應用如下


1.標記細胞,如疾病及藥物研究、干細胞研究、細胞凋亡研究; 

2.標記基因,如轉基因動物模型研究,基因表達和藥物代謝研究;

3.標記DNA及RNA,特別是基因治療方面的應用; 

4.標記細菌,如研究蛋白質相互作用、代謝等。利用活體生物熒光成像技術可以檢測到,并能連續觀察其對機體的侵染過程以及抗病毒藥物和抗生素對其病理過程的影響。


將攜帶熒光素酶編碼基因(Luciferase)的質?;虿《巨D染入細胞,再導入研究動物如大、小鼠體內,之后注入底物熒光素(通常以熒光素鉀鹽或鈉鹽的形式),通過生物發光成像技術(BLI)來檢測光強度變化,從而實時監測疾病發展狀態或藥物的治療功效等。


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