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干擾慢病毒
簡介

RNA干擾(RNA interference, RNAi) 是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉錄產物mRNA存在同源互補序列的雙鏈RNA(double strand RNA, dsRNA) 導入細胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產生相應的功能表型缺失。

RNAi提供了一種經濟、快捷、高效的抑制特異基因表達的技術手段,有助于研究該基因在生物模型系統中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段?,F今發現的主要起干擾作用的RNAi主要有兩類小分子RNA:一類是microRNA(miRNA);另一類是siRNA (small interfering RNA)。

siRNA制備的方法一般有:化學合成siRNA,哺乳動物細胞載體shRNA克隆和慢病毒載體shRNA克隆。

將慢病毒載體的shRNA質粒與慢病毒包裝輔助質粒和包膜質粒共轉染293T細胞,收集上清進行濃縮純化,獲取高滴度的慢病毒,相對于SiRNA和shRNA質粒,shRNA慢病毒的感染范圍更廣,如依賴轉染試劑難轉染的細胞:原代細胞、懸浮細胞等,并可實現穩定、長效抑制基因表達。


干擾原理.png

干擾原理(圖片來源:RNA Therapeutics Institute)

特點

與化學合成siRNA和基于瞬時表達載體構建的shRNA相比,利用慢病毒構建的shRNA:一方面可以擴增瞬時表達的載體使用,另一方面,lentivirus-shRNA克隆經過慢病毒包裝系統包裝后,可用于感染傳統轉染試劑難于轉染的細胞系如原代細胞,懸浮細胞和處于非分裂狀態的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達。

吉滿生物科技(上海)有限公司主要提供以慢病毒為主的應用于臨床前細胞學實驗和整體動物實驗的針對不同基因和藥物靶標的各種即用型病毒顆粒。利用相關載體把shRNA導入細胞,載體中的U6啟動子確保shRNA表達;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去,從而使基因的沉默是可遺傳的。


推薦使用:

(1)適用于在難以轉染的細胞中進行的RNA干擾研究,如原代神經細胞,干細胞,腫瘤細胞等;

(2)適用于快速建立穩定表達沉默特定基因的細胞株;

(3)適用于In vivo 實驗,包括穩定表達細胞株成瘤實驗、局部注射等;

(4)適用于轉基因動物,特別是轉基因大鼠的制備。

服務流程
優勢

(1)吉滿生物專注提供病毒包裝服務十余年,慢病毒包裝服務經驗豐富!

(2)ISO9001認證的質量體系,嚴格的病毒純化工藝!

(3)上萬篇SCI期刊引用,包括Cell、Science、Nature等頂級期刊!

(4)技術團隊響應快、服務好 從質粒構建到病毒包裝僅需5周即可發貨!

(5)完善的客戶服務體系,技術支持、項目跟進、售后服務獲得客戶一致好評,確保您訂購無憂!

案例展示
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干擾慢病毒
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RNA干擾(RNA interference, RNAi) 是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉錄產物mRNA存在同源互補序列的雙鏈RNA(double strand RNA, dsRNA) 導入細胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產生相應的功能表型缺失。

RNAi提供了一種經濟、快捷、高效的抑制特異基因表達的技術手段,有助于研究該基因在生物模型系統中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段?,F今發現的主要起干擾作用的RNAi主要有兩類小分子RNA:一類是microRNA(miRNA);另一類是siRNA (small interfering RNA)。

siRNA制備的方法一般有:化學合成siRNA,哺乳動物細胞載體shRNA克隆和慢病毒載體shRNA克隆。

將慢病毒載體的shRNA質粒與慢病毒包裝輔助質粒和包膜質粒共轉染293T細胞,收集上清進行濃縮純化,獲取高滴度的慢病毒,相對于SiRNA和shRNA質粒,shRNA慢病毒的感染范圍更廣,如依賴轉染試劑難轉染的細胞:原代細胞、懸浮細胞等,并可實現穩定、長效抑制基因表達。


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干擾原理(圖片來源:RNA Therapeutics Institute)

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與化學合成siRNA和基于瞬時表達載體構建的shRNA相比,利用慢病毒構建的shRNA:一方面可以擴增瞬時表達的載體使用,另一方面,lentivirus-shRNA克隆經過慢病毒包裝系統包裝后,可用于感染傳統轉染試劑難于轉染的細胞系如原代細胞,懸浮細胞和處于非分裂狀態的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達。

吉滿生物科技(上海)有限公司主要提供以慢病毒為主的應用于臨床前細胞學實驗和整體動物實驗的針對不同基因和藥物靶標的各種即用型病毒顆粒。利用相關載體把shRNA導入細胞,載體中的U6啟動子確保shRNA表達;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去,從而使基因的沉默是可遺傳的。


推薦使用:

(1)適用于在難以轉染的細胞中進行的RNA干擾研究,如原代神經細胞,干細胞,腫瘤細胞等;

(2)適用于快速建立穩定表達沉默特定基因的細胞株;

(3)適用于In vivo 實驗,包括穩定表達細胞株成瘤實驗、局部注射等;

(4)適用于轉基因動物,特別是轉基因大鼠的制備。

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