生物體細胞內最重要的能量來源是ATP,是衡量細胞新陳代謝水平的重要指標。在同種細胞,近似的培養條件下,ATP的含量與活細胞數目具有良好的線性關系。即可通過ATP含量反應活細胞的數目。螢火蟲螢光素酶(Firefly luciferase)是一種分子量約為61kDa的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,其能夠把螢光素(luciferin)催化成氧化熒光素(oxyluciferin),在氧化的過程中會發出波長為560nm左右的生物熒光。即該反應為ATP依賴的發光反應。其發光強度與ATP含量線性相關。
圖:檢測原理示意