細胞自噬,簡單的說就是“吃掉自己”。是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中進行降解并得以循環利用。自噬包括生理條件下的基礎型自噬和應激條件下的誘導型自噬。研究表明,自噬能在細胞穩態、衰老、免疫、腫瘤發生及神經退行性疾病等多種生理病理過程中發揮重要作用。
細胞自噬,簡單的說就是“吃掉自己”。是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中進行降解并得以循環利用。自噬包括生理條件下的基礎型自噬和應激條件下的誘導型自噬。研究表明,自噬能在細胞穩態、衰老、免疫、腫瘤發生及神經退行性疾病等多種生理病理過程中發揮重要作用。
自噬原理圖
自噬標志物分子LC3,是微管相關蛋白輕鏈3(MAP1LC3)的簡稱,它貫穿整個自噬過程,哺乳動物的LC3可分為三種:LC3A、LC3B和LC3C。
自噬發生時,LC3蛋白合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,產生細胞漿定位的LC3-I。在自噬過程中,LC3-I會被包括Atg7和Atg3在內的泛素樣體系所修飾和加工,產生分子量為14kD的LC3-II,并定位到自噬小體中。
LC3-II 的含量和發生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。
吉滿自主研發出單熒光(綠光或紅光)標記的自噬指示產品,當細胞內沒有自噬發生時,熒光-LC3融合蛋白會均勻地分散在細胞質中,一旦細胞發生自噬活動,熒光-LC3融合蛋白就會聚集并轉位到自噬體膜,此時在熒光顯微鏡下可清晰地觀察到明亮的熒光斑點,斑點數量的多少就代表了自噬活動的強弱。
吉滿自主研發的雙熒光自噬慢病毒,可用于標記及追蹤LC3以及自噬流的變化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是穩定的熒光表達基團,不受外界影響。由于自噬小體進入第二階段后,與溶酶體進行融合,形成自噬溶酶體。由于自噬溶酶體內的酸性環境,導致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱表明溶酶體與自噬小體融合形成了自噬溶酶體。而mRFP是一直穩定表達的,因而可以通過GFP與mRFP的亮點比例來評價自噬流進程。
產品貨號 | 產品名稱 |
GM-0220LV04
|
pGMLV-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
|
GM-0220LV05
|
pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
|
GM-0220LV07
|
PGMLV-CMV-TurboRFP-EGFP-H_LC3 Lentivirus
|
產品貨號 | 產品名稱 |
GM-0220LV04
|
pGMLV-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
|
GM-0220LV05
|
pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
|
GM-0220LV07
|
PGMLV-CMV-TurboRFP-EGFP-H_LC3 Lentivirus
|
細胞自噬,簡單的說就是“吃掉自己”。是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中進行降解并得以循環利用。自噬包括生理條件下的基礎型自噬和應激條件下的誘導型自噬。研究表明,自噬能在細胞穩態、衰老、免疫、腫瘤發生及神經退行性疾病等多種生理病理過程中發揮重要作用。
自噬原理圖
自噬標志物分子LC3,是微管相關蛋白輕鏈3(MAP1LC3)的簡稱,它貫穿整個自噬過程,哺乳動物的LC3可分為三種:LC3A、LC3B和LC3C。
自噬發生時,LC3蛋白合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,產生細胞漿定位的LC3-I。在自噬過程中,LC3-I會被包括Atg7和Atg3在內的泛素樣體系所修飾和加工,產生分子量為14kD的LC3-II,并定位到自噬小體中。
LC3-II 的含量和發生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。
吉滿自主研發出單熒光(綠光或紅光)標記的自噬指示產品,當細胞內沒有自噬發生時,熒光-LC3融合蛋白會均勻地分散在細胞質中,一旦細胞發生自噬活動,熒光-LC3融合蛋白就會聚集并轉位到自噬體膜,此時在熒光顯微鏡下可清晰地觀察到明亮的熒光斑點,斑點數量的多少就代表了自噬活動的強弱。
吉滿自主研發的雙熒光自噬慢病毒,可用于標記及追蹤LC3以及自噬流的變化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是穩定的熒光表達基團,不受外界影響。由于自噬小體進入第二階段后,與溶酶體進行融合,形成自噬溶酶體。由于自噬溶酶體內的酸性環境,導致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱表明溶酶體與自噬小體融合形成了自噬溶酶體。而mRFP是一直穩定表達的,因而可以通過GFP與mRFP的亮點比例來評價自噬流進程。